小鼠和人类的听觉系统在发育及功能上较相似，因此，利用小鼠模型筛查耳蜗听觉毛细胞发育过程中的重要基因对毛细胞再生和临床上寻找耳聋基因的治疗靶点具有重要意义。
中科院脑智卓越中心刘志勇课题组在2018年建立的CRISPR-stop技术能够将蛋白编码序列转化为终止密码子，在适当的位置创造一个空等位基因，并在单细胞阶段的胚胎中诱导产生同源突变体的F0代小鼠。这避免了小鼠繁殖，可帮助快速筛选非致死基因。然而该方法有个弊端，小鼠约25％的哺乳动物基因的功能丧失会导致早期致死。
近日，刘志勇课题组首次尝试在子代的两个胚胎中的一个进行CRISPR-stop诱导，以产生嵌合Atoh1和Sox10 F0小鼠，并将这种方法命名为嵌合CRISPR-stop。这些小鼠不仅比常规Atoh1/Sox10基因敲除小鼠存活时间长，而且还表现出其公认的耳蜗表型。
通过使用嵌合CRISPR-stop方法，研究团队发现了另一个致死基因Rbm24在耳蜗外毛细胞（OHCs）存活中的一个先前未知的作用。通过使用Rbm24条件性敲除模型，团队进一步验证了Rbm24在OHCs中的重要性。
研究结果共同证明了嵌合CRISPR-stop方法具有较好的可靠性，并能快速进行基因筛选。这种方法将促进小鼠内耳以及其他器官中发育致死基因的快速遗传筛选。
该研究成果以论文形式在线发表于期刊Development，题为Mosaic CRISPR-stop enables rapid phenotyping of nonsense mutations in essential genes.
论文链接
https://doi.org/10.1242/dev.196899
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